<nav id="hjphs"></nav>

    <video id="hjphs"><center id="hjphs"></center></video>
  1. <u id="hjphs"><button id="hjphs"></button></u>
      <wbr id="hjphs"></wbr>

        <u id="hjphs"><sub id="hjphs"></sub></u>
      1. <optgroup id="hjphs"><strike id="hjphs"></strike></optgroup>

        <wbr id="hjphs"></wbr>
        <i id="hjphs"></i>
          我們使用cookie改善您的瀏覽體驗并提供有意義的內容。請閱讀我們的cookie協議
          收藏我們 在線訂購
               

          機構用戶解決方案

          產品選擇指南

          技術服務信息

          當前位置:首頁 > 新聞中心
          無標題文檔
           
          Takara腺相關病毒基因導入系統解決方案
           
          基因治療將使醫學領域發生革命,為治療常見和罕見遺傳性疾病帶來了新希望。在基因治療這場競技賽中,腺相關病毒(AAV)載體已經迅速成為體內基因導入主要平臺之一。
          AAV已經在多個遺傳性眼科疾病治療臨床試驗中顯現出有明顯的治療效果,而且不會引起顯著的不良免疫反應。AAV也是一種廣泛應用于癌癥基因治療的病毒載體。多種AAV載體已被用于腫瘤治療,眾多臨床前研究結果顯示,AAV基因治療成功抑制腫瘤生長,致使腫瘤消退。另外,AAV還廣泛應用于血液病、代謝類等疾病的治療研究,展現出了廣闊的應用前景。
          由于AAV免疫原性和細胞毒性低,能夠轉導非分裂細胞,并且整合到宿主基因組中的頻率非常低,因此被眾多研究學者認為安全性更高。經過重組和改造的AAV擁有不同的血清型,根據血清型不同而具有不同的宿主范圍和病毒特征,可以有效作用于特定細胞類型,包括分裂和非分裂細胞類型。使用者需要根據靶標細胞或者組織類型選擇適合的血清型。目前使用頻率較高的血清型為AAV2,其它血清型也逐漸被廣泛使用。
           
          AAV“身世”大揭秘
          AAV基因組是約4.7 kb的單鏈線狀DNA分子,在兩端都有被稱為反向末端重復序列(ITR)的發夾結構。ITR的功能在于基因組復制起始位點及輔助病毒粒子包裝。AAV基因組包含了3個開放閱讀框:Rep編碼參與復制和轉錄的蛋白質;Cap編碼病毒衣殼蛋白質;AAP編碼用于病毒粒子形成的非結構蛋白質。Rep區域編碼4種不同的蛋白質(Rep78, Rep68, Rep52和Rep40,Cap區域編碼3種不同的蛋白質(VP1, VP2 和 VP3 )。
          一般來說,AAV只有在輔助病毒(如腺病毒或皰疹病毒)存在下才能復制。目前,AAV的包裝制備大多使用無輔助病毒包裝系統,也就是在不使用輔助病毒的情況下制備重組AAV。AAV的制備也是通過將編碼重組AAV所需因子的質粒轉染HEK 293細胞來完成的。制備AAV載體一般需要以下3種質粒:含有目的基因表達框和2個ITR的質粒,包含AAV2 Rep基因和各種血清型Cap基因的質粒,包含腺病毒E2A、E4、VA基因的質粒。
           
          Takara AAV產品解決方案
          從表達、包裝、提取到純化和滴度測定,一站式購齊,省心無憂。
           
          ★ 無輔助病毒AAV載體制備系統
          AAV Helper Free System是一種特別的可制備高滴度AAV的無輔助病毒系統,可提供AAV 1型 (AAV1) 、2型 (AAV2) 、5型 (AAV5) 、6型 (AAV6) 制備系統。我們在該系統的包裝載體中引入了一種可提高病毒滴度的人源miRNA(hsa-miR-342),與一般只表達Rep基因和Cap基因的pRC2 Vector相比,病毒滴度可提高2倍。由于AAV是一種微小病毒,可克隆的目的基因片段大小限制在不超過2.5 kb。
           
          ★ 強強聯合的AAV-CRISPR系統
          AAV與CRISPR/Cas9基因編輯技術結合使用,可以通過AAV載體導入CRISPR/Cas9進行基因治療,可以讓更多無望治療的疾病變成有望治愈。在AAV-CRISPR 系統方面,可以提供釀膿鏈球菌(Streptococcus pyogenes)和金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)兩種不同來源Cas9的系統:攜帶釀膿鏈球菌來源的Cas9(SpCas9)的雙載體系統和攜帶金黃色葡萄球菌來源的Cas9(SaCas9)的單載體系統。SaCas9與SpCas9不同,SaCas9所識別的PAM序列為NNGRR(T),N表示任意堿基,R表示A或者G,T具有較強的偏好性。
           
          ★ 擴大AAV載體產量必備單品
          AAV2傾向于保留在制備細胞中(由于肝素結合域的原因),可以使用專用的提取試劑AAVpro Extraction Solution從制備細胞中提取并回收病毒粒子。而其他血清型AAV,更容易釋放到培養液中,因此從培養液中分離AAV可以有效擴大AAV載體產量。AAVpro Concentrator就是可以從細胞培養上清液中分離濃縮任何血清型AAV載體這樣一種簡便高效的方法。與僅涉及AAV粒子沉淀的其他濃縮方法相比,AAVpro Concentrator操作過程中包含了過濾步驟,可以產生更高純度的AAV載體。
           
          ★ 通用簡便的AAV載體純化方式
          AAV載體作為體內基因導入的主要平臺之一,使用高純度的病毒粒子是很有必要的。即便是將基因導入至培養細胞時,使用純化后的AAV粒子也可以消除雜質所帶來的影響。AAV粒子的純化通常使用CsCl密度梯度超速離心法或碘克沙醇超速離心法,但這兩種方法不僅需要熟練的操作手法,同時還存在耗時長和回收率低等問題。Takara通用型AAVpro Purification Kit不受血清型限制,可以從AAV粒子制備細胞中純化出AAV粒子:特別的AAV粒子提取方法,省去了凍融和超聲破碎等繁瑣操作;特別的AAV載體純化方法,通過簡單的操作即可有效去除雜質。
           
          ★ 通用快速的AAV滴度測定方法
          Takara基于qPCR技術開發了通過測定AAV基因組來測定AAV滴度的試劑盒,同以往的DNA印跡法和ELISA法相比,可以更準確、更快速地(2.5小時以內)獲得實驗結果。AAVpro Titration Kit(for Real Time PCR)Ver.2試劑盒中的引物特異針對AAV載體的公共區域AAV2反向末端重復序列(ITR)而設計,如果載體的ITR區域來自AAV2(實際上常用的AAV載體也正是這樣的情況),那么無論您制備出的AAV病毒是哪種血清型(取決于病毒包裝時所使用的Cap基因),都可以使用這個試劑盒測定病毒滴度。如果不確定該試劑盒是否適用,請與我們的技術服務部門聯系,并提供您的載體序列。
           
          Takara AAV產品選擇指南
           
           
           
           
          Takara Bio作為重要的生物技術企業,在病毒基因導入系統方面造詣頗深、體系完備,擁有慢病毒系統、逆轉錄病毒系統、腺相關病毒系統、腺病毒全套解決方案,為相關生物學基礎研究提供強力支持,為寄予厚望的細胞與基因治療研究護航加碼。
           
          《基因導入實驗操作手冊》免費申領通道已開通!基因導入方法及其特點、主要基因導入方法的原理、主要病毒載體特征、病毒載體選擇指南,眾多干貨知識盡在其中。趕快點擊下方圖片申領吧。
           
           
          亚洲精品无码午夜在线观看_无码屋免费AV观看_日本高清专区一区二区_亚洲精品国产品国语在线
          <nav id="hjphs"></nav>

            <video id="hjphs"><center id="hjphs"></center></video>
          1. <u id="hjphs"><button id="hjphs"></button></u>
              <wbr id="hjphs"></wbr>

                <u id="hjphs"><sub id="hjphs"></sub></u>
              1. <optgroup id="hjphs"><strike id="hjphs"></strike></optgroup>

                <wbr id="hjphs"></wbr>
                <i id="hjphs"></i>

                  頁面更新:2023-05-30 14:43:57